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大鼠肿瘤坏死因子γELISA试剂盒[大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)ELISA试剂盒,大鼠TNF-γ ELISA试剂盒]

 
商品编号:
JEB-13772
品牌:
金益柏
规格:
96T/48T
CAS:
库存:
20
售价:
¥0.00
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产品介绍Product Description

规格:96T/48T

分类:生化检测

储存条件:2~8℃

用途:ELISA检测

注意事项:定量/定性


产品名称:大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)ELISA试剂盒

品牌:金益柏                   

种属:大鼠ELISA试剂盒

保存及有效期:2~8℃,六个月;-20℃,一年

产品用途:科研实验

检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA  

检测目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清液及相关液体样本中肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)的含量。

ELISA试剂盒标本:血清,血浆,尿液,细胞培养上清,体液,心房水,组织标本等

产品优势

1.产品种类齐全、质量可靠、价格优惠、灵敏度高、效果稳定、易保存、操作简便

2.免费提供产品最新报价、实验原理、产品用途及说明书

3.发货及时(南京本地客户有专门人员送货上门及取标本)

4.免费提供ELISA待测服务,金益柏拥有自己的实验室和技术团队

5.公司提供全方位的售前,售中,售后技术支持服务,为您解决实验过程中遇到的问题。

 

一、实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)水平。用纯化的大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子γ(TNF-γ),再与HRP标记的肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)含量。

 

二、大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)ELISA试剂盒组成:

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品:9ng/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

标准品稀释液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8℃保存

酶标试剂

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

样品稀释液

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

显色剂A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

显色剂B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

终止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

浓缩洗涤液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃保存

 

三、自备材料

1)蒸馏水。
2
)加样器:5ul10ul50ul100ul200ul500ul1000ul
3
)振荡器及磁力搅拌器等。

 

四、大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)ELISA试剂盒样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

 

五、样本信息问题解答 

我能否使用自己的稀释液或者缓冲液?

答:每个试剂盒中都含有按配方配制的与特异性样品种属相配套的稀释液,以确保待检测的样品被正确稀释。具体请参看说明书。

建议:

①   确定待检测的样品在收集和制备时保证无菌操作;

②   如果要检测多个样品,将样品隔离并标记清楚以防相互污染;

③   检测前,将样品离心除去颗粒。将样品转至新的离心管内,混合均匀;

④   在混合样品时,使用容积至少比样品体积大50%的离心管以保证混合充分。

 

我没有足量的稀释液去稀释所有的样品,怎么办

答:①试剂盒内提供说明书中所指定的足量的稀释液。能保证所有的标准品和样品检测两次;

②如果没有推荐的稀释度,或者需要大量稀释,请在实验前计算出所需的稀释液总量,然后联系技术服务部门获取额外的稀释液。

 

我能否使用试剂盒内非推荐的样品类型?

答:试剂盒内说明书中所指定的样品类型是经过验证可行的,其他推荐的样品类型是没有经过任何检测的。

 

六、大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)ELISA试剂盒操作步骤


 

七、注意事项:

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

 

八、计算:

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 

(此图仅供参考)

 

九、大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)ELISA试剂盒性能

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批间应分别小于9%11%

 












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